Le mécanisme d’action de l’endostatine

Définition de Endostatine
L’endostatine est le plus efficace, les meilleurs résultats expérimentaux des inhibiteurs de l’angiogenèse tumorale, au cours des dernières années beaucoup d’attention, les États-Unis a été stade Ⅰ et Ⅱ essais cliniques, et peut devenir une nouvelle génération de médicaments anti-tumoraux.
Structure de l’endostatine
L’endostatine est un inhibiteur endogène de l’angiogenèse isolé à partir du surnageant de la tumeur des cellules endothéliales de souris (EOMA) en culture en 1997 par O’Reilly et al., Une protéine de poids moléculaire de 20 kd. L’analyse de séquence d’acides aminés a montré que l’endostatine était la partie C-terminale du collagène 18, avec un total de 184 acides aminés. L’endostatine est le produit de dégradation du collagène 18, le processus de dégradation comprend au moins une étape d’hydrolyse enzymatique, impliquée dans l’hydrolyse enzymatique de l’élastase, de la cathepsine L et des métalloprotéinases de matrice. Une autre analyse de structure cristalline a révélé que la structure endostatine avait une région basique consistant en 11 résidus arginine en tant que site de liaison à l’héparine, ce qui expliquait les propriétés d’affinité élevée de l’endostatine à l’héparine et éventuellement la région et les facteurs angiogéniques concurrencent l’héparine. Angiogenèse. Cependant, des études ont montré que la liaison de l’endostatine à la paroi du vaisseau ne dépend pas du site de liaison à l’héparine et ne présente aucun effet inhibiteur compétitif avec le FGF-2. En outre, on a trouvé dans la séquence d’endostatine un site de liaison d’ions de zinc composé de son résidu d’acide aspartique 3, 3, 11, 3, 11, 3, 11, 3 histidine 1-terminale et N-terminal du N-terminal et du zinc et de l’endostatine N- Côté pour former une structure dimérique. Il a été suggéré que l’endostatine et la liaison aux ions zinc étaient importantes pour son activité anti-angiogénique, mais des études ultérieures sur l’élimination des sites de liaison aux ions zinc par modification génique indiquaient que l’endostatine inhibait la migration des cellules endothéliales et la croissance tumorale sans dépendre des sites de liaison des ions zinc.
La fonction biologique de l’endostatine

1, l’endostatine inhibe les cellules endotheliales vasculaires: l’endostatine peut inhiber spécifiquement la prolifération des cellules endotheliales vasculaires induite par le bFGF, inhiber la migration des cellules endotheliales, induire l’apoptose des cellules endothéliales, mais pour les cellules non endothéliales, comme les cellules musculaires lisses, les fibroblastes 3T3, Lewis cellules de cancer du poumon et donc pas d’effet inhibiteur. Kim et al. Egalement démontré que l’endostatine inhibe la capacité des cellules endotheliales de la veine ombilicale humaine à pénétrer dans la membrane basale artificielle et est dose-dépendante par rapport aux effets inhibiteurs.
2, l’inhibition de l’endostatine de l’angiogenèse: À l’heure actuelle, une variété d’expériences peuvent confirmer l’endostatine sur la croissance des vaisseaux sanguins inhiber le tissu vasculaire statique ne fonctionne pas. O’Reilly et ainsi de suite à travers l’expérience de la membrane chorioallantoïde embryonnaire de poulet (CAM), avec E. coli ou baculovirus expression de l’endostatine a montré une importante inhibition de l’angiogenèse embryonnaire du poulet, et aucune toxicité. Bloch et d’autres études ont montré que l’endostatine n’affecte pas la guérison des plaies, la contraction de la plaie, l’infection de la plaie et la cicatrisation de la régénération épithéliale, mais peut réduire la formation de tissu de granulation. Yin et ainsi de porter le gène endostatine lentivirus recombinant injecté TNF induite par la souris arthrite rhumatoïde primaire dans l’articulation, les résultats montrent que l’endostatine peut inhiber l’angiogenèse intravasculaire et la formation de pannus, réduire les avancées rhumatoïdes dans l’arthrite. Indiquant que l’endostatine peut non seulement inhiber l’angiogenèse tumorale, l’inflammation vasculaire pathologique inhibe également le rôle.

3, l’endostatine sur la croissance tumorale et l’inhibition des métastases Beaucoup de chercheurs à la maison et à l’étranger en utilisant la protéine endostatine recombinante ou par l’endostatine des expériences de thérapie génique montrent que l’endostatine sur une variété de croissance de tumeur solide et métastases peuvent produire l’inhibition. Le cancer du poumon Lewis, le mélanome, le cellulome, les cellules endotheliales vasculaires, le carcinome des cellules rénales et d’autres tumeurs tumorales, le traitement après 6 cycles de tumeur dans la dormance, après arrêt Aucune récidive de la tumeur, et aucune métastase n’a eu lieu. Dans le même temps au niveau cellulaire, il existe des expériences que l’endostatine peut inhiber la migration des cellules tumorales dans le gel de la membrane basale artificielle. Perletti et d’autres utilisations de dimethylbenzene anthracene (DMBA) induite par le cancer du sein modèle animal de rat, 4 jours consécutifs par injection sous-cutanée jour d’endostatine 20 mg / kg, de sorte que 4 semaines après la tumeur est encore en dormance, indiquant que l’endostatine La tumeur primaire a également une Effet inhibiteur significatif.
La perspective de l’endostatine
Endostatine de la découverte pour entrer dans la phase II des essais cliniques en cours, à peine quelques années, a fait des progrès ont fait le monde beaucoup encouragé. Les expériences montrent que l’inhibition spécifique de l’endostatine des cellules endothéliales vasculaires a confirmé le rôle d’une variété de dépendantes de la production de tumeurs solides ont un effet inhibiteur et aucune résistance aux médicaments et les effets secondaires évidents pour le traitement clinique de la tumeur ouvert un nouveau chemin . Avec la clarification complète du mécanisme de l’endostatine, et comment la production à grande échelle, la purification de la protéine d’endostatine recombinante active hautement efficace, comment prolonger la demi-vie in vivo de l’endostatine, comment choisir un transporteur sûr et efficace pour la thérapie génique. Correctement sélectionner les indications et le traitement d’une telle série de problèmes à résoudre, je crois que l’endostatine sur la thérapie anti-angiogénique tumorale aura une plus grande application perspectives.
Le mécanisme d’action de l’endostatine
À l’heure actuelle, le système d’expression du gène d’endostatine humain recombinant comprend principalement le système d’expression d’Escherichia coli, le système d’expression de levure, le système d’expression de cellules de mammifère et ainsi de suite. L’expression d’Escherichia coli est élevée, mais le produit se présente principalement sous la forme d’un corps d’inclusion, insoluble et difficile à renaturer, provoquant une application gênante, bien qu’il soit soluble dans le repliement des protéines, mais ce processus perdra beaucoup de protéine . Les produits d’expression de cellules de mammifères ont une activité élevée mais sont peu exprimés et difficiles à purifier. Et l’expression de levure est élevé, facile à purifier, une activité élevée, en particulier Pichia pastoris système d’expression est largement utilisé dans l’expression de l’endostatine, les États-Unis pour la première phase des essais cliniques de l’endostatine est l’expression de Pichia pastoris The O ‘Reilly et al. En utilisant E. coli pour exprimer l’endostatine dans des souris porteuses de tumeurs, 2,5 mg / kg ont réduit le volume tumoral du cancer du poumon de Lewis de 53%, 10 mg / kg, le volume tumoral a été réduit de 97% à 20 Mg / kg, la tumeur primaire Était presque complètement atrophique, et 0,3 mg / (kg • d) de l’endostatine pouvait inhiber complètement la croissance des métastases du cancer du poumon de Lewis.